缺血性脑病是目前危害人类健康的重要病症。对于脑血流以及脑血管微循环的研究成为脑血管疾病研究领域的热点。但由于脑部结构的特殊性,软脑膜微血管研究成为脑血流研究的理想选择。
使用Gene&I-MC1微血管分析系统,可对动物软脑膜进行清晰成像,并得到软脑膜血管的动态变化。通过对图像的处理分析,获取软脑膜血管的管径、白细胞粘附、红细胞速度、血管损伤等参数。对于研究脑血管药物的药效或者脑部疾病发病机制具有很大的帮助作用。
本例以内皮素来观察大鼠软脑膜上细动脉痉挛现象。
实验具体操作如下:
实验动物:wistar大鼠,雄性,提供250g左右
实验仪器:Gene&I-MC1微血管分析系统
试剂:内皮素、20%乌拉坦
器材:手术剪刀、小弯镊、眼科剪、缝合线、颅骨钻
具体操作
1.20%乌拉坦肌肉注射麻醉大鼠。
2.大鼠俯卧,使用专用的脑部固定装置固定大鼠头部。去掉大鼠颅骨表面皮毛,暴露颅骨。使用显微镊去掉颅骨表面筋膜。使用颅骨钻沿骨缝内侧磨薄一矩形区域,面积5mm×5mm.至手感骨片浮动时,使用弯镊提起骨片,去掉。暴露软脑膜表面。
3.将暴露的大鼠软脑膜表面置于Gene&I-MC1微血管分析系统镜头下,选取20-40μm宽,200μm长的细动脉,进行微血管的观察。并进行动态视频录制。
4.细动脉痉挛:在软脑膜表面添加4-5滴内皮素,再次对软脑膜上的细动脉观察并进行视频录制。
5.打开分析软件,将录制的软脑膜细动脉视频导入,分析软脑膜细动脉在滴加内皮素前后血管管径、血细胞运动速度的变化。